Biochrom30+ 氨基酸分析儀檢測(cè)茶葉酸水解后的氨基酸2025/08/21 閱讀：264
方案摘要
摘要
本品為不同品類(lèi)的茶葉中的氨基酸，使用Biochrom30+全自動(dòng)氨基酸分析儀，對(duì)其所含的氨基酸組分及含量進(jìn)行酸水解并分析測(cè)定。結(jié)果表明該未知樣中氨基酸各單個(gè)氨基酸含量的濃度見(jiàn)附頁(yè)結(jié)果表。其中樣01氨基酸總含量為29.103 umol/mL，02氨基酸總含量為28.806 umol/mL，03氨基酸總含量為30.371 umol/mL。由譜圖測(cè)試過(guò)程中可知，其茶葉中還含有其他種類(lèi)的氨基酸，所以再茶品類(lèi)的檢測(cè)中，使用包含檢測(cè)項(xiàng)目更多的生理體液系統(tǒng)會(huì)更全面，準(zhǔn)確。
一、樣品前處理 1、 所用試劑 1.1 Loading Buffer：鈉鹽系統(tǒng)，pH 2.2 1.2 濃鹽酸，濃度≥36%,優(yōu)級(jí)純 1.3 6mol/L 鹽酸：取500mL 鹽酸加水稀釋至1000mL,混勻 1.4 水：去離子水 1.5 17種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品
2、前處理設(shè)備 1）分析天平:精度為 0.0001g 2）移液槍及槍頭 3）一次性注射器及0.22um濾膜 4）低范圍pH試紙 5）真空干燥烘箱 6）無(wú)油真空泵 7）電熱平板及稱(chēng)量瓶 3、樣品制備（參考GB 5009.124-2016食品中氨基酸的測(cè)定） 移液槍準(zhǔn)確移取試樣1mL，加入水解管中，加入10mL 6mol/L鹽酸(1.3)，冷凍3min?5min,接到真空泵的抽氣管上,抽真空(接近0Pa),然后充入氮?dú)?重復(fù)抽真空-充入氮?dú)獠襟E3次后,在充氮?dú)鉅顟B(tài)下擰緊螺蓋。 將水解管放入真空干燥箱中，110°C水解22-24h，冷卻、混勻、開(kāi)管、轉(zhuǎn)移并定容到50ml容量瓶中，用移液槍取適量水解液于稱(chēng)量瓶中，在電熱平板上60℃濃縮至干，必要時(shí)加入少許水(1.4)，重復(fù)蒸干1-2次，加入適量PH2.2的稀釋上機(jī)用檸檬酸鈉緩沖液溶解(1.1),振蕩混勻后,吸取溶液通過(guò)0.22 μm 濾膜后,轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶,為樣品測(cè)定液,供儀器測(cè)定用。 二、分析方法描述（Biochrom 30+） 氨基酸分析儀分析方法參數(shù)： 1）色譜柱：Biochrom Na型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱，4.6x20cm 2）分離程序： 運(yùn)行時(shí)間：經(jīng)分析時(shí)間+再生時(shí)間 60.15min 3）反應(yīng)單元溫度：135°C 4）檢測(cè)波長(zhǎng)：570nm、440nm同時(shí)檢測(cè) 三、樣品中氨基酸含量的計(jì)算 樣品測(cè)定液氨基酸的含量按式（1）計(jì)算: Ci = Cs/As × Ai× F ………………（1）式中: Ci ——樣品測(cè)定液氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL); Cs ——氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL); Ai ——試樣測(cè)定液氨基酸i的峰面積; As ——氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的峰面積; F ——樣品稀釋倍數(shù)。 附：茶葉中的酸水解氨基酸種類(lèi)及其分析圖譜、做樣結(jié)果： 圖1. 樣品01 圖2. 樣品02 圖3. 樣品03
