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魯?shù)婪蛘酃夥?密度計(jì)法測(cè)定人血白蛋白含量

2025/09/03  閱讀:229

方案摘要

人血白蛋白是由乙型肝炎疫苗免疫的健康人血漿,經(jīng)低溫乙醇蛋白分離法提取,并經(jīng)病毒滅活后制成。用于治療因失血、創(chuàng)傷和燒傷引起的休克,腦水腫及大腦損傷所致的腦壓增高,防治低蛋白血癥及肝硬化或腎病引起的水腫或腹水。蛋白質(zhì)含量是人血白蛋白質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。


常規(guī)的白蛋白含量的測(cè)定方法是:血細(xì)胞分析儀,雙縮脲比色法,凱氏定氮,紫外光吸收法等方法。其均需加 入試劑,增加反應(yīng)時(shí)間,實(shí)驗(yàn)步驟繁多,費(fèi)時(shí)復(fù)雜。本方法是根據(jù)不同介質(zhì)的折射率不同的物理特性,通過(guò)折射率讀數(shù),計(jì)算出蛋白含量。


2010 版中國(guó)藥典第三部明確將折光法運(yùn)用于單份血漿中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定。


圖片


樣品和標(biāo)準(zhǔn)品

標(biāo)準(zhǔn)品名稱:人血白蛋白20%濃度;

客戶樣品:濃度為12%的人血白蛋白溶液。


折光法儀器和附件

? 美國(guó)魯?shù)婪蚬?nbsp;( Rudolph Research Analytical ) J-457 折光儀

? 純化水

? 無(wú)水乙醇

測(cè)量過(guò)程

1. 開機(jī),調(diào)用方法:Refractive Index;

2. 用純化水 ( 20 ℃ ) 進(jìn)行校驗(yàn),校驗(yàn)通過(guò);

3. 配置標(biāo)準(zhǔn)曲線:

① 人血白蛋白:取濃度為10g/50mL (20%)的標(biāo)準(zhǔn)品,用純化水分別稀釋成濃度為1%、5%、10%、15% 的樣品;

4. 取一小滴樣品,直接放置在棱鏡上,設(shè)置溫度為20℃,等待溫度穩(wěn)定后,按start 鍵進(jìn)行測(cè)量;

5. 測(cè)量結(jié)束后,將樣品擦除,并用純化水和無(wú)水乙醇分別進(jìn)行清洗棱鏡。


測(cè)量結(jié)果

1. 零點(diǎn)檢測(cè)


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2. 標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)量結(jié)果

① 人血白蛋白J-457標(biāo)準(zhǔn)曲線


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② 將人血白蛋白的標(biāo)準(zhǔn)曲線用“用戶自定義公式”編輯功能,保存至儀器內(nèi)


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J457人血白蛋白標(biāo)曲方法


③ 常規(guī)人血白蛋白樣品檢測(cè)的結(jié)果


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J457人血白蛋白方法樣品測(cè)試結(jié)果


④ 密度計(jì)法檢測(cè)人血白蛋白


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⑤ 將人血白蛋白的標(biāo)準(zhǔn)曲線用“用戶自定義公式”編輯功能,保存至儀器內(nèi)


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圖片

DDM 2909人血白蛋白標(biāo)曲方法


⑥ 通過(guò)密度計(jì)測(cè)試常規(guī)樣品的測(cè)試結(jié)果


圖片

DDM-2909人血白蛋白方法樣品測(cè)試結(jié)果


結(jié)論:

折光法/密度法均可簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、快速的用于蛋白生產(chǎn)制備的中間品和終產(chǎn)品的蛋白含量指標(biāo),可以指導(dǎo)生產(chǎn)及濃縮,提純等過(guò)程。




配置單
折光儀 J457

型號(hào):J457

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型號(hào):Granupack

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型號(hào):Rudolph 多參數(shù)系統(tǒng)

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型號(hào):DDM-J

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