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魯道夫折光法/密度計法測定人血白蛋白含量

2025/09/03  閱讀:224

方案摘要

人血白蛋白是由乙型肝炎疫苗免疫的健康人血漿,經低溫乙醇蛋白分離法提取,并經病毒滅活后制成。用于治療因失血、創傷和燒傷引起的休克,腦水腫及大腦損傷所致的腦壓增高,防治低蛋白血癥及肝硬化或腎病引起的水腫或腹水。蛋白質含量是人血白蛋白質量評價的重要指標。


常規的白蛋白含量的測定方法是:血細胞分析儀,雙縮脲比色法,凱氏定氮,紫外光吸收法等方法。其均需加 入試劑,增加反應時間,實驗步驟繁多,費時復雜。本方法是根據不同介質的折射率不同的物理特性,通過折射率讀數,計算出蛋白含量。


2010 版中國藥典第三部明確將折光法運用于單份血漿中蛋白質含量的測定。


圖片


樣品和標準品

標準品名稱:人血白蛋白20%濃度;

客戶樣品:濃度為12%的人血白蛋白溶液。


折光法儀器和附件

? 美國魯道夫公司 ( Rudolph Research Analytical ) J-457 折光儀

? 純化水

? 無水乙醇

測量過程

1. 開機,調用方法:Refractive Index;

2. 用純化水 ( 20 ℃ ) 進行校驗,校驗通過;

3. 配置標準曲線:

① 人血白蛋白:取濃度為10g/50mL (20%)的標準品,用純化水分別稀釋成濃度為1%、5%、10%、15% 的樣品;

4. 取一小滴樣品,直接放置在棱鏡上,設置溫度為20℃,等待溫度穩定后,按start 鍵進行測量;

5. 測量結束后,將樣品擦除,并用純化水和無水乙醇分別進行清洗棱鏡。


測量結果

1. 零點檢測


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2. 標準樣品測量結果

① 人血白蛋白J-457標準曲線


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② 將人血白蛋白的標準曲線用“用戶自定義公式”編輯功能,保存至儀器內


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J457人血白蛋白標曲方法


③ 常規人血白蛋白樣品檢測的結果


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J457人血白蛋白方法樣品測試結果


④ 密度計法檢測人血白蛋白


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⑤ 將人血白蛋白的標準曲線用“用戶自定義公式”編輯功能,保存至儀器內


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DDM 2909人血白蛋白標曲方法


⑥ 通過密度計測試常規樣品的測試結果


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DDM-2909人血白蛋白方法樣品測試結果


結論:

折光法/密度法均可簡單、準確、快速的用于蛋白生產制備的中間品和終產品的蛋白含量指標,可以指導生產及濃縮,提純等過程。




配置單
魯道夫數字式密度儀/計 DDM2911

型號:DDM2911

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折光儀 J457

型號:J457

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