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創新分子診斷質控方案 —— 重組類噬菌體顆粒包裹靶標 RNA 病毒基因片段

在分子診斷領域,如何為檢測方法提供穩定、可控、且與真實病原體特性高度相似的質控材料,一直是行業的挑戰。

ZeptoMetrix 團隊研發了一種創新的類噬菌體顆粒(Phage-like Particles, PLPs)技術,可將特定 RNA 病毒的基因片段封裝其中,作為分子檢測的質控品。該方法使用重組質粒表達系統與噬菌體外殼蛋白融合標簽技術,實現了快速生產、純化和精確定量,并在 2–8°C 下保持長期穩定性。

這種技術已在 SARS-CoV-2 與流感 A 病毒的質控開發中取得突破進展,為臨床與科研檢測提供了更高質量、更安全的標準化解決方案。


研究摘要:

本研究旨在開發一種創新的分子診斷質控材料——重組類噬菌體顆粒(Phage-like Particles, PLPs),用于封裝特定 RNA 病毒基因片段,以滿足核酸檢測中對穩定、安全、高度模擬真實樣本的質控需求。研究團隊基于 pZMCPLP 載體系統,在 E. coli BL21 菌株中利用 T7 啟動子驅動的雙表達系統,同時表達噬菌體外殼蛋白與成熟蛋白(融合 His 標簽),并通過自組裝形成封裝目標 RNA 的類噬菌體顆粒。

生產流程包括自動誘導培養、超聲裂解、核酸酶處理、親和層析純化(TALON 鈷柱)、SDS-PAGE 與 Western Blot 鑒定、透射電子顯微鏡成像,以及數字滴度 PCR 定量分析。

結果表明,所制備的 MS2 類噬菌體顆粒在 2–8°C 條件下可長期穩定(實驗驗證至數百天),且能精準提供不同拷貝數濃度(5×10?、1×10?、1×1010 cp/mL)的 RNA 質控品。該方法不僅簡化了 PLP 的生產流程,還通過融合 His 標簽的成熟蛋白實現了快速、簡便的純化步驟。

這一成果為分子診斷領域提供了高穩定性、可定制化、非傳染性的 RNA 質控材料,可廣泛應用于新發傳染病檢測、實驗室質量控制以及體外診斷試劑研發。

Cole-Parmer  2025-08-14  |  閱讀:306
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